Механизм действия
Ремдесивир является аденозиновым нуклеотидным пролекарством, которое метаболизируется в клетках организма с образованием фармакологически активного метаболита нуклеозидтрифосфата. Ремдесивира трифосфат выступает в качестве аналога аденозинтрифосфата (АТФ) и конкурирует с природным АТФ-субстратом за включение в формирующиеся РНК-цепи с помощью РНК-зависимой РНК-полимеразы вируса SARS-CoV-2, что приводит к задержанному обрыву цепи во время репликации вирусной РНК. В качестве дополнительного механизма ремдесивир трифосфат также может ингибировать синтез вирусной РНК после его включения в вирусную РНК-матрицу в результате считывания вирусной полимеразой, что может происходить в присутствии более высоких концентраций нуклеотидов. Когда нуклеотид ремдесивира присутствует в матрице вирусной РНК, эффективность включения комплементарного природного нуклеотида снижается, тем самым ингибируя синтез вирусной РНК.
Противовирусная активность
Ремдесивир проявлял противовирусную активность in vitro в отношении клинического изолята вируса SARS-CoV-2 в первичных эпителиальных клетках дыхательных путей человека с полумаксимальной эффективной концентрацией вещества (EC50) 9.9 нМ через 48 ч с момента начала лечения. Ремдесивир ингибировал репликацию SARS-CoV-2 в непрерывных линиях эпителиальных клеток легких человека Calu-3 при значении EC50 280 нМ после 72 часов лечения. Значения EC50 ремдесивира в отношении SARS-CoV-2 в клетках Vero составляли 137 нМ через 24 ч и 750 нМ через 48 ч с момента начала лечения.
Хлорохина фосфат оказывал дозозависимое антагонистическое влияние на противовирусную активность ремдесивира, когда два препарата совместно инкубировались в клинически значимых концентрациях в клетках HEp-2, инфицированных респираторно-синцитиальным вирусом. Более высокие значения EC50 ремдесивира наблюдались при увеличении концентрации хлорохина фосфата. Повышение концентрации хлорохинфосфата снижало образование ремдесивиртрифосфата в A549-hACE2, HEp-2 и в нормальных клетках бронхиального эпителия человека.
На основании испытаний in vitro ремдесивир сохранил схожую противовирусную активность (<2,5-кратное изменение) в отношении клинических изолятов SARS-CoV-2, содержащих замену P323L в вирусной полимеразе, включая альфа (B.1.1.7), бета (B. 1.351), гамма (P.1), эпсилон (B.1.429), каппа (B.1.617.1), лямбда (C.37), йота (B.1.526) и дзета (P.2) варианты по сравнению с более ранними линиями изолятов SARS-CoV-2 (линия А). Для клинических изолятов вариантов Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529, BA.1, BA.2, BA.2.12.1, BA.4 и BA.5) ремдесивир также поддерживал противовирусную активность (<0,7-кратное изменение) по сравнению с изолятами линии А SARS-CoV-2. Противовирусная активность ремдесивира в отношении вариантов SARS-CoV-2 представлена в таблице 7.
Таблица 7. Противовирусная активность Ремдесивира в отношении клинических изолятов вариантов SARS-CoV-2
Род SARS-CoV-2 — Номенклатура ВОЗ — Ключевые замены — Ремдесивир EC50 (нМ) — Кратное изменение восприимчивости — Изменение восприимчивости
А — - — - — 110 — 1.0
B.1.1.7 — Альфа — P323L — 192 — 1.58 — Без измененийа
B.1.351 — Бета — P323L — 141 — 1.19 — Без измененийа
P.1 — Гамма — P323L — 97 — 0.82 — Без измененийа
B.1.617.2 — Дельта — P323L, G671S — 70 — 0.59 — Без измененийа
B.1.429 — Эпсилон — P323L — 210 — 1.94 — Без измененийа
P.2 — Зета — P323L — 151 — 1.17 — Без измененийа
B.1.526 — Йота — P323L — 258 — 2.33 — Без измененийа
B.1.617.1 — Каппа — P323L — 77 — 0.63 — Без измененийа
C.37 — Лямбда — P323L — 175 — 1.37 — Без измененийа
B.1.1.529/BA.1 BA.2 BA.2.12.1 BA.2.75 BA.4 BA.4.6 BA.5 BF.5 BQ.1.1 XBB — Омикрон — P323L P323L P323L P323L, G671S P323L P323L P323L P323L Y273H, P323L P323L, G671S — 44 25 33 32 25 92 106 134 90 86 — 0.45 0.23 0.20 0.30 0.15 0.64 0.66 0.94 1.12 1.07 — Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа Без измененийа
а Изменение кратности: < 2,5 - несущественно. Все варианты не демонстрируют снижения восприимчивости.
Резистентность
В культивируемых клетках
Изоляты SARS-CoV-2 со сниженной чувствительностью к ремдесивиру были отобраны в культивируемых клетках. В ходе одной селекции с использованием GS-441524, исходного нуклеозида ремдесивира, появились вирусные пулы, экспрессирующие комбинации аминокислотных замен в V166A, N198S, S759A, V792I, C799F и C799R в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе, что приводит к кратным изменениям EC50. от 2,7 до 10,4. При индивидуальном введении в рекомбинантный вирус дикого типа путем сайт-направленного мутагенеза наблюдалось снижение чувствительности к ремдесивиру в 1,7–3,5 раза. При втором отборе с использованием ремдесивира с использованием изолята SARS-CoV-2, содержащего замену P323L в вирусной полимеразе, появилась единственная замена аминокислоты в V166L. Рекомбинантные вирусы с заменами только в P323L или в комбинации P323L+V166L показали 1,3- и 1,5-кратное изменение чувствительности к ремдесивиру соответственно.
В культивируемых клетках устойчивость к ремдесивиру с использованием вируса гепатита мыши (коронавирус грызунов) определялась развитием двух замен (F476L и V553L) в РНК-зависимой РНК-полимеразе вируса в остатках, сохранившихся во всех коронавирусах, что способствовало 5,6-кратному снижению восприимчивости к ремдесивиру. При введении аналогичных замен (F480L и V557L) в образец вируса SARS-CoV было продемонстрировано 6-кратное снижение восприимчивости к ремдесивиру в культивируемых клетках, а патогенность вируса SARS-CoV на мышиной модели была ослаблена.
При индивидуальном введении в рекомбинантный вирус SARS-CoV-2 каждая соответствующая замена в F480L и V557L приводила к двукратному снижению чувствительности к ремдесивиру.
В клинических исследованиях
В исследовании NIAID ACTT-1 (CO-US-540-5776) среди 61 пациента с доступными исходными и исходными данными секвенирования частота появления замен в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе была одинаковой у пациентов, получавших ремдесивир по сравнению с плацебо. У 2 пациентов, получавших препарат ремдесивир, наблюдались замены в РНК-зависимой РНК-полимеразе, выявленные ранее в экспериментах по отбору резистентности (V792I или C799F) и связанные с малократным изменением чувствительности к ремдесивиру (≤3,4 раза). Никакие другие замены РНК-зависимой РНК-полимеразы, наблюдаемые у пациентов, получавших ремдесивир, не были связаны с резистентностью к ремдесивиру.
В исследовании GS-US-540-5773 среди 19 пациентов, получавших ремдесивир, у которых были доступны исходные и пост-исходные данные секвенирования, замены в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе (nsp12) наблюдались у 4 пациентов. Замены T76I, A526V, A554V и C697F не были связаны с устойчивостью к ремдесивиру (≤1,45-кратное изменение чувствительности). Влияние замены E665K на чувствительность к ремдесивиру не удалось определить из-за отсутствия репликации.
В исследовании GS-US-540-9012 среди 244 пациентов с доступными исходными и пост-исходными данными секвенирования частота появления замен в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе была одинаковой у пациентов, получавших ремдесивир, по сравнению с плацебо. У одного пациента, получавшего ремдесивир, возникла одна замена в РНК-зависимой РНК-полимеразе (A376V), которая была связана со снижением чувствительности к ремдесивиру in vitro (в 12,6 раза). Никакие другие замены в РНК-зависимой РНК-полимеразе или других белках репликационно-транскрипционного комплекса, наблюдаемые у пациентов, получавших ремдесивир, не были связаны с резистентностью к ремдесивиру.
В исследовании GS-US-540-5912 среди 60 пациентов с доступными исходными и пост-исходными данными секвенирования замены в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе (A656P и G670V) наблюдались у 8 пациентов, получавших ремдесивир. У 4 пациентов, получавших ремдесивир, возникли замены в РНК-зависимой РНК-полимеразе (M794I, C799F или E136V), которые были связаны со снижением чувствительности к ремдесивиру in vitro (≤3,5 раза). Никакие другие замены в РНК-зависимой РНК-полимеразе, обнаруженные у пациентов, получавших ремдесивир, не были связаны с резистентностью к ремдесивиру.
В исследовании GS-US-540-5823 среди пациентов с доступными исходными и исходными данными секвенирования замены в вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразе (A656P и G670V) наблюдались у одного из 23 пациентов, получавших ремдесивир. Наблюдаемые замены не были связаны с устойчивостью к ремдесивиру.
Клиническая эффективность и безопасность
Клинические исследования на пациентах с COVID-19
Исследование NIAID ACTT-1 (CO-US-540-5776)
Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование оценивало ремдесивир в дозе 200 мг один раз в день в течение 1 дня с последующим приемом ремдесивира в дозе 100 мг один раз в день в течение до 9 дней (в общей сложности до 10 дней внутривенной терапии) у госпитализированных взрослых пациентов с COVID-19 с признаками поражения нижних дыхательных путей. В исследование было включено 1062 госпитализированных пациента: 159 (15%) пациентов с заболеванием легкой/средней степени тяжести (15% в обоих группах лечения) и 903 (85%) пациента с тяжелым заболеванием (85% в обоих группах лечения). Легкая/средняя степень определяется по SpO2> 94% и частоте дыхания <24 вдохов/мин без дополнительного кислорода; тяжелая степень определяется по SpO2 ≤94% на воздухе в помещении или частота дыхания ≥24 вдоха/мин и требует дополнительного кислорода или вентиляции. В общей сложности 285 пациентов (26,8%) (n = 131 получали ремдесивир) находились на ИВЛ/экстракорпоральной мембранной оксигенации (ЭКМО). Пациенты были рандомизированы 1:1, стратифицированы по тяжести заболевания при включении в исследование, для получения ремдесивира (n = 541) или плацебо (n = 521) плюс стандартное лечение.
Исходный средний возраст составлял 59 лет, и 36% пациентов были в возрасте 65 лет и старше. 64 % были мужчинами, 53% - белыми, 21% - черными, 13% - азиатами. Наиболее частыми сопутствующими заболеваниями были гипертензия (51%), ожирение (45%), сахарный диабет 2 типа (31%); распределение сопутствующих заболеваний было одинаковым между обеими группами лечения.
Примерно 38.4% (208/541) пациентов прошли 10-дневный курс лечения ремдесивиром.
Первичной клинической конечной точкой было время до выздоровления в течение 29 дней после рандомизации, которое определялось как выписка из больницы (с ограничениями активности или без них и с домашним кислородом или без них) или госпитализация, но не требующая дополнительного кислорода и более не требующая постоянного медицинского ухода. Среднее время до выздоровления в общей популяции составило 10 дней в группе ремдесивира по сравнению с 15 днями в группе плацебо (коэффициент выздоровления 1,29; [95% ДИ 1,12 до 1,49], р <0,001).
Не наблюдалось различий во времени до выздоровления в группе пациентов с заболеваниями легкой и средней степени тяжести при поступлении (n=159). Среднее время до выздоровления составило 5 дней в группе ремдесивира и 7 дней в группе плацебо (коэффициент скорости выздоровления 1,10; [95% ДИ 0,8] до 1,53); шансы на улучшение по порядковой шкале в группе ремдесивира на 15ый день по сравнению с группой плацебо были следующими: соотношение шансов 1,2; [95% ДИ 0,7 до 2,2, р = 0,562].
В страте тяжелого заболевания при поступлении (n=903) среднее время до выздоровления составляло 12 дней в группе ремдесивира и 19 дней в группе плацебо (коэффициент выздоровления 1,34 [95% ДИ: от 1,14 до 1,58]; р < 0,001); шансы на улучшение по порядковой шкале в группе ремдесивира на 15ый день по сравнению с группой плацебо были следующими: соотношение шансов 1,6; [95% ДИ от 1,3 до 2,0].
В целом, шансы на улучшение по порядковой шкале были выше в группе ремдесивира на 15ый день по сравнению с группой плацебо (отношение шансов 1,6; [95% ДИ от 1,3 до 1,9], р < 0,001).
Смертность за 29 дней в общей популяции составила 11,6% в группе ремдесивира по сравнению с 15,4% в группе плацебо (отношение рисков 0,73; [95% ДИ от 0,52 до 1,03]; p = 0,07). Последующий анализ смертности за 29 дней по порядковой шкале представлен в таблице 8.
Таблица 8. Результаты 29-дневной смертности по порядковой шкалеа на исходном уровне от NIAID ACTT-1
Порядковый номер на исходном уровне
5 — 6
Требуется кислород с низким расходом — Требуется высокая подача кислорода или неинвазивная механическая вентиляция
Ремдесивир N = 232 — Плацебо N = 203 — Ремдесивир N = 95 — Плацебо N = 98
Смертность за 29 дней — 4.1 — 12.8 — 21.8 — 20.6
Коэффициент извлеченияб — 0.30 (0.14, 0.64) — 1.02 (0.54, 1.91)
аНе предварительный анализ
бКоэффициент извлечения рассчитывается по стратифицированной модели Кокса.
Исследование GS-US-540-5773 пациентов с тяжёлой степенью COVID-19
В рандомизированном многоцентровом клиническом исследовании открытого типа (Исследование 5773) пациентов от 12 лет с подтвержденной инфекцией SARS-CoV-2, насыщением воздуха кислородом ≤ 94% в помещении и рентгенологическими признаками пневмонии сравнивались 200 пациентов, получавших ремдесивир в течение 5 дней со 197 пациентами, получавшими ремдесивир в течение 10 дней. Все пациенты получали 200 мг ремдесивира в 1ый день и 100 мг один раз в день в последующие дни вкупе с поддерживающими мероприятиями. Первичной конечной точкой стало клиническое состояние на 14 день, оцениваемое по 7-балльной шкале, начиная с выписки из больницы и заканчивая повышением уровня кислорода и вентиляционной поддержки до смерти.
Вероятность улучшения на 14 день у пациентов, рандомизированных на 10-дневный курс ремдесивира, по сравнению с пациентами, рандомизированными на 5-дневный курс, составила 0,67 (соотношение шансов); [95% ДИ от 0,46 до 0,98]. В этом исследовании наблюдались статистически значимые различия в исходном клиническом статусе. После корректировки различий между группами на исходном уровне вероятность улучшения на 14 день составила 0,75 (соотношение шансов); [95% ДИ от 0,51 до 1,12]. Кроме того, не наблюдалось статистически значимых различий в выздоровлении или смертности при 5-дневном и 10-дневном лечении с поправкой на различия между группами на исходном уровне. 28-дневная смертность от всех причин составила 12% против 14% в 5 и 10-дневных группах лечения, соответственно.
Исследование GS-US-540-9012 у пациентов с подтвержденным COVID-19 с повышенным риском прогрессирования заболевания
Было проведено рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, многоцентровое клиническое исследование для оценки терапии ремдесивиром в амбулаторных условиях у 562 пациентов, включая 8 подростков (в возрасте 12 лет и старше и весом не менее 40 кг) с подтвержденным COVID-19 и по крайней мере одним фактором риска прогрессирования заболевания до госпитализации. Факторами риска прогрессирования заболевания были: возраст ≥ 60 лет, хроническое заболевание легких, артериальная гипертензия, сердечно-сосудистые или цереброваскулярные заболевания, сахарный диабет, ожирение, иммунодефицитное состояние, хроническое заболевание почек легкой или средней степени тяжести, хроническое заболевание печени, текущий рак или серповидно-клеточная анемия. Вакцинированные пациенты были исключены из исследования.
Пациенты, получавшие ремдесивир, получали 200 мг в 1-й день и 100 мг один раз в сутки в последующие дни, в общей сложности 3 дня в/в терапии. Пациенты были рандомизированы в соотношении 1:1, стратифицированы по проживанию в учреждении квалифицированного сестринского ухода (да/нет), возрасту (< 60 против ≥ 60 лет) и региону (США против бывшего США) для получения ремдесивира (n = 279) или плацебо (n=283) вместе со стандартным лечением.
Исходно средний возраст составлял 50 лет (30% пациентов были в возрасте 60 лет и старше); 52% были мужчинами, 80% были белыми, 8% были темнокожими, 2% азиатами, 44% испанцами или латиноамериканцами; средний индекс массы тела составил 30,7 кг/м2. Наиболее частыми сопутствующими заболеваниями были сахарный диабет (62%), ожирение (56%) и артериальная гипертензия (48%). Медиана (Q1, Q3) продолжительности симптомов до лечения составила 5 (3,6) дней; медиана вирусной нагрузки составляла 6,3 log10 копий/мл на исходном уровне. Исходные демографические характеристики и характеристики заболевания были сбалансированы в группах лечения ремдесивиром и плацебо. Последующий исследовательский анализ образцов необязательных биомаркеров показал, что 14,8% пациентов были серологически положительными на исходном уровне и 37,7% были серологически отрицательными (47,5% не дали согласия для сбора необязательных биомаркеров).
Первичной конечной точкой была доля пациентов с госпитализацией, связанной с COVID-19 (определяемой как не менее 24 часов неотложной помощи), или 28-дневная смертность от всех причин. События (госпитализация, связанная с COVID-19, или смертность от всех причин в течение 28 дней) наблюдались у 2 (0,7%) пациентов, получавших ремдесивир, по сравнению с 15 (5,3%) пациентами, одновременно рандомизированными в группу плацебо, что продемонстрировало снижение заболеваемости COVID-19 на 87% или смертность от всех причин по сравнению с плацебо (соотношение рисков 0,134 [95% ДИ от 0,031 до 0,586]; р=0,0076). Абсолютное снижение риска составило 4,6% (95% ДИ, от 1,8% до 7,5%). На 28-й день летальных исходов не наблюдалось. Шесть из 17 случаев госпитализации произошли имели место участников с известным исходным серологическим статусом (серологически положительный: n=0 в группе ремдесивира и n=2 в группе плацебо; серологический отрицательный: n=2 в группе ремдесивира и n =2 в группе плацебо). Одиннадцать из 17 случаев госпитализации произошли у участников с неизвестным исходным серостатусом в группе плацебо и ни у одного в группе ремдесивира. Нельзя сделать вывод об эффективности в подгруппах, стратифицированных по серологическому статусу, из-за небольшого числа пациентов с известным серологическим статусом и общей низкой частотой событий.
Исследование GS-US-540-5912 у пациентов с COVID-19 и почечной недостаточностью
В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом клиническом исследовании (исследование GS-US-540-5912) оценивали ремдесивир в дозе 200 мг один раз в сутки в течение 1 дня с последующим приемом ремдесивира в дозе 100 мг один раз в сутки в течение 4 дней (в общей сложности до 5 дней) внутривенно у 243 госпитализированных взрослых пациентов с подтвержденным COVID-19 и почечной недостаточностью. В исследование были включены 90 пациентов (37%) с ОПП (острое повреждение почек)(определяемой как повышение уровня креатинина сыворотки на 50% в течение 48-часового периода, которое сохранялось в течение ≥6 часов, несмотря на поддерживающую терапию), 64 пациента (26%) с ХБП (рСКФ < 30 мл/мин) и 89 пациентов (37%) с тХПН (рСКФ <15 мл/мин), нуждающихся в гемодиализе. Пациенты были рандомизированы в соотношении 2:1, стратифицированы по терминальной стадии почечной недостаточности, потребности в кислороде с высокой скоростью потока и региону (США или экс-США) для получения ремдесивира (n=163) или плацебо (n=80) плюс стандартное лечение.
Исходно средний возраст составлял 69 лет (62% пациентов в возрасте 65 лет и старше); 57 % пациентов были мужчинами, 67 % — белыми, 26 % — чернокожими и 3 % — азиатами. Наиболее распространенными исходными факторами риска были артериальная гипертензия (89%), сахарный диабет (79%) и сердечно-сосудистые или цереброваскулярные заболевания (51%); распределение факторов риска было одинаковым между двумя группами лечения. В общей сложности 45 пациентов (19%) получали кислород с высокой скоростью потока, 144 (59%) — кислород с низкой скоростью потока и 54 (22%) — комнатный воздух в начале исследования; ни один пациент не находился на инвазивной искусственной вентиляции легких (ИВЛ). В общей сложности 182 пациента (75%) не получали заместительной почечной терапии, а 31 пациент (13%) получил вакцину против COVID-19.
Исследование было закрыто преждевременно из-за проблем с осуществимостью и не имело достаточных возможностей для оценки первичных (смерть от всех причин или IMV к 29-му дню) и вторичных конечных точек эффективности из-за более низкого, чем ожидалось, охвата.
Интервал QT
Текущие доклинические и клинические данные не предполагают риска удлинения интервала QT, но удлинение интервала QT у людей полностью не изучено.
Дети
Исследование GS-US-540-5823 представляет собой открытое исследование с участием одной группы, в котором изучалась и оценивалась фармакокинетика и безопасность ремдесивира у детей с COVID-19 в возрасте от 28 дней и с массой тела от 3 кг (n = 53). оценивается. Конечные точки эффективности были вторичными и анализировались путем описания, поэтому их следует интерпретировать с осторожностью. Исследование в настоящий момент продолжается.
Пациенты с массой тела более 40 кг получали 200 мг ремдесивира в 1-й день, затем в последующие дни по 100 мг один раз в сутки (т.е. взрослую дозировку); пациенты с массой тела от ≥ 3 до < 40 кг получали ремдесивир в дозе 5 мг/кг в 1-й день, а затем ремдесивир в дозе 2,5 мг/кг один раз в сутки в последующие дни. Медиана (диапазон) воздействия ремдесивира составляла 5 (1, 10) дней.
Исходно средний возраст составлял 7 лет (диапазон: от 0,1 до 17 лет); 57% были женщинами; средний вес составил 24,6 кг (диапазон: от 4 до 192 кг). В общей сложности 19 пациентов (37%) страдали ожирением (ИМТ к возрасту ≥ 95-го процентиля); 7 (58%), 2 (17%), 3 (27%), 3 (27%) и 4 (80%) пациентов в когортах 1, 2, 3, 4 и 8 соответственно. В общей сложности 12 пациентов (23%) находились на инвазивной искусственной вентиляции легких (2 балла по 7-балльной порядковой шкале), 18 (34%) находились на неинвазивной вентиляции или высокопоточной оксигенации (3 балла); 10 (19%) получали кислород с низким потоком (4 балла); и 13 (25%) обходились обычным воздухом (5 баллов) в начале исследования. Общая медиана (Q1, Q3) продолжительности симптомов и госпитализации до первой дозы ремдесивира составила 5 (3, 7) дней и 1 (1, 3) день соответственно.
В общей популяции исследования среднее (Q1, Q3) изменение клинического статуса по сравнению с исходным уровнем (оценивалось по 7-балльной порядковой шкале от смерти [1 балл] до выписки из больницы [7 баллов]) составляло +2,0 (1,0, 4,0) балла на 10-й день. Среди пациентов с порядковой оценкой ≤ 5 баллов на исходном уровне доля тех, кто имел улучшение клинического состояния на ≥ 2 балла на 10-й день, составила 75,0% (39/52); медиана (Q1, Q3) времени до выздоровления составила 7 (5, 16) дней. В целом 60% пациентов были выписаны к 10-му дню. Большинство пациентов, 92% (49/53), получали как минимум 1 сопутствующий препарат, кроме ремдесивира, для лечения COVID-19, включая иммуномодуляторы и противовоспалительные препараты. Три пациента скончались во время исследования.
Европейское агентство по лекарственным средствам отсрочило обязательство по представлению результатов исследований ремдесивира в одной или нескольких группах детей (информацию о применении детьми см. в разделах 4.2 и 5.2).