Механизм действия
Марибавир представляет собой конкурентный ингибитор протеинкиназы UL97. Ингибирование UL97 происходит в фазе репликации вирусной ДНК, ингибируя серин/треонинкиназу UL97 путем конкурентного ингибирования связывания АТФ с киназным АТФ-связывающим сайтом, не влияя на процесс созревания конкатемера, отменяя фосфотрансферазу, ингибирующую репликацию и созревание ДНК ЦМВ, капсидирование ДНК ЦМВ и ядерный выход ДНК ЦМВ.
Противовирусная активность
Марибавир ингибировал репликацию ЦМВ человека в снижении выхода вируса, гибридизации ДНК и анализах уменьшения бляшек в клетках линии клеток фибробластов легких человека (MRC-5), эмбриональной почки человека (HEK) и клеток фибробластов крайней плоти человека (MRHF). Значения EC50 варьировались от 0,03 до 2,2 мкМ в зависимости от клеточной линии и конечной точки анализа. Противовирусная активность марибавира в культуре клеток также оценивалась в отношении клинических изолятов ЦМВ. Средние значения EC50 составляли 0,1 мкМ (n=10, диапазон 0,03-0,13 мкМ) и 0,28 мкМ (n=10, диапазон 0,12-0,56 мкМ) с использованием анализов гибридизации ДНК и уменьшения бляшек соответственно. Не наблюдалось существенной разницы в значениях EC50 для четырех генотипов гликопротеина B ЦМВ человека (N = 2, 1, 4 и 1 для gB1, gB2, gB3 и gB4 соответственно).
Комбинированная противовирусная активность
При тестировании марибавира в сочетании с другими противовирусными соединениями наблюдался антагонизм противовирусной активности в сочетании с ганцикловиром. Не наблюдалось антагонизма с цидофовиром, фоскарнетом и летермовиром.
Вирусная устойчивость
В клеточной культуре
Марибавир не влияет на ДНК-полимеразу, кодируемую UL54, которая при наличии определенных мутаций придает устойчивость к ганцикловиру/валганцикловиру, фоскарнету и/или цидофовиру. Мутации, придающие устойчивость к марибавиру, были идентифицированы в гене UL97: L337M, F342Y, V353A, V356G, L397R, T409M, H411L/N/Y, D456N, V466G C480F, P521L и Y617del. Эти мутации придают устойчивость, которая колеблется от 3,5-кратного до > 200-кратного увеличения значений EC50. Варианты гена UL27 (R233S, W362R, W153R, L193F, A269T, V353E, L426F, E22stop, W362stop, 218delC и 301311del) придавали лишь умеренную устойчивость к марибавиру (<5-кратное увеличение EC50), в то время как L335P придавал высокую устойчивость к марибавиру.
В клинических исследованиях
В исследовании 2 фазы 202 и исследовании 203, оценивающем марибавир у 279 реципиентов ТГСК или ТСО, данные генотипирования pUL97 после лечения у 23 из 29 пациентов, которые первоначально достигли элиминации виремии, а затем перенесли рецидив ЦМВ-инфекции во время приема марибавира, показали 17 пациентов с мутациями T409M или H411Y и 6 пациентов с мутацией C480F. Среди 25 пациентов, которые не реагировали на терапию марибавиром в течение > 14 дней, у 9 были обнаружены мутации T409M или H411Y, а у 5 пациентов — мутация C480F. Дополнительное генотипирование pUL27 было проведено у 39 пациентов в исследовании 202 и у 43 пациентов в исследовании 203. Единственной связанной с устойчивостью аминокислотной заменой в pUL27, которая не была обнаружена на исходном уровне, была G344D. Фенотипический анализ рекомбинантов pUL27 и pUL97 показал, что мутации pUL97 T409M, H411Y и C480F вызывают 78-кратное, 15-кратное и 224-кратное увеличение, соответственно, EC50 марибавира по сравнению со штаммом дикого типа, тогда как мутация pUL27 G344D не показала различий в EC50 марибавира по сравнению со штаммом дикого типа.
В исследовании 303 фазы 3, оценивающем марибавир у пациентов с фенотипической резистентностью к валганцикловиру/ганцикловиру, был проведен анализ последовательности ДНК всех кодирующих областей pUL97 и pUL27 на 134 парных последовательностях пациентов, получавших марибавир. Возникшие после лечения замены pUL97 F342Y (в 4,5 раза), T409M (в 78 раз), H411L/N/Y (в 69, 9 и 12 раз соответственно) и/или C480F (в 224 раза) были обнаружены у 60 пациентов и были связаны с отсутствием ответа (у 47 пациентов лечение было неудачным, а у 13 - рецидивным). Один пациент с заменой pUL27 L193F (снижение чувствительности к марибавиру в 2,6 раза) на исходном уровне не достиг первичной конечной точки. Кроме того, следующие множественные мутации были связаны с отсутствием ответа; F342Y+T409M+H411N (78-кратный), C480F+H411L+H411Y (224-кратный), F342Y+H411Y (56-кратный), T409M+C480F (224-кратный) и H411Y+C480F (224-кратный).
Перекрестная устойчивость
Перекрестная устойчивость наблюдалась между марибавиром и ганцикловиром/ валганцикловиром (vGCV/GCV) в клеточной культуре и в клинических исследованиях.
В фазе 3 исследования 303 в общей сложности 44 пациента в группе марибавира получали заместительную терапию, связанную с эмерджентной резистентностью (RAS), к лечению, назначенному исследователем (IAT). Из них 24 имели возникшие в ходе лечения C480F или F342Y RAS, оба обладают перекрестной устойчивостью как к ганцикловиру/валганцикловиру, так и к марибавиру. Из этих 24 пациентов 1 (4%) достиг первичной конечной точки. В целом только восемь из этих 44 пациентов достигли первичной конечной точки.
Замены pUL97 vGCV/GCV, связанные с резистентностью, F342S/Y, K355del, V356G, D456N, V466G, C480R, P521L и Y617del снижают восприимчивость к марибавиру более чем в 4,5 раза. Другие пути устойчивости к vGCV/GCV не оценивались на предмет перекрестной устойчивости к марибавиру. Замены ДНК-полимеразы pUL54, придающие устойчивость к vGCV/GCV, цидофовиру или фоскарнету, оставались чувствительными к марибавиру.
Замены pUL97 F342Y и C480F представляют собой замены, связанные с развитием резистентности к марибавиру, которые обеспечивают более чем 1,5-кратное снижение восприимчивости к vGCV/GCV, кратное снижение, связанное с фенотипической устойчивостью к vGCV/GCV. Клиническое значение этой перекрестной устойчивости к vGCV/GCV для этих замен не определено. Резистентный к марибавиру вирус оставался чувствительным к цидофовиру и фоскарнету. Кроме того, нет сообщений о каких-либо заменах, связанных с резистентностью к марибавиру в pUL27, оцениваемых на перекрестную резистентность к vGCV/GCV, цидофовиру или фоскарнету. Учитывая отсутствие связанных с устойчивостью замен для этих препаратов, сопоставленных с pUL27, перекрестная устойчивость не ожидается для замен pUL27 марибавиром.
Клиническая эффективность и безопасность
Ливтенсити оценивали в фазе 3, многоцентровом, рандомизированном, открытом, активно контролируемом исследовании (SHP620-303, исследование 303) для оценки эффективности и безопасности марибавира по сравнению с назначаемой исследователем терапией (IAT) у 352 реципиентов ТГСК или ТСО с ЦМВ-инфекциями, рефрактерными к лечению ганцикловиром, валганцикловиром, фоскарнетом или цидофовиром, включая ЦМВ-инфекции с или без подтвержденной резистентности к одному или нескольким анти-ЦМВ препаратам.
Рефрактерная ЦМВ-инфекция определялась как документально подтвержденная невозможность снижения > 1 log10 уровня ДНК ЦМВ в цельной крови или плазме после 14-дневного или более длительного периода лечения внутривенным введением ганцикловира/перорального валганцикловира, внутривенного введения фоскарнета или внутривенного введения цидофовира. Это определение было применено к текущей ЦМВ-инфекции и к последнему введенному анти-ЦМВ агенту.
Пациенты были стратифицированы по типу трансплантата (ТГСК или ТСО) и скринингу уровней ДНК ЦМВ, а затем рандомизированы в соотношении 2:1 для получения либо препарата Ливтенсити 400 мг два раза в сутки, либо IAT(ганцикловир, валганцикловир, фоскарнет или цидофовир) в дозировке, установленной исследователем, на срок до 8 недель. После завершения периода лечения пациенты вступили в 12-недельную фазу наблюдения.
Средний возраст испытуемых составлял 53 года, большинство испытуемых были мужчинами (61%), белыми (76%), и не латиноамериканцами (83%), с аналогичным распределением в двух группах лечения.
Таблица 3. Сводные данные исходных характеристик заболевания в исследовании 303
Характеристикаa — IAT — Ливтенсити 400 мг дважды в день
(N=117) — (N=235)
Лечение IAT до рандомизации, n (%)b
Ганцикловир/ Валганцикловир — 98 (84) — 204 (87)
Фоскарнет — 18 (15) — 27 (12)
Цидофовир — 1 (1) — 4 (2)
Лечение IAT после рандомизации, n (%)
Фоскарнет — 47 (41) — n/a
Ганцикловир/ Валганцикловир — 56 (48) — n/a
Цидофовир — 6 (5) — n/a
Фоскарнет + Ганцикловир/Валганцикловир — 7 (6) — n/a
Тип трансплантации, n (%)
ТГСК — 48 (41) — 93 (40)
ТСОc — 69 (59) — 142 (60)
Почкиd — 32 (46) — 74 (52)
Легкиеd — 22 (32) — 40 (28)
Сердцеd — 9 (13) — 14 (10)
Множественнаяd — 5 (7) — 5 (4)
Печеньd — 1 (1) — 6 (4)
Поджелудочная железаd — 0 — 2 (1)
Кишечникd — 0 — 1 (1)
Категория уровней ДНК ЦМВ по данным центральной лаборатории, n (%)e
Высокий — 7 (6) — 14 (6)
Средний — 25 (21) — 68 (29)
Низкий — 85 (73) — 153 (65)
Исходная симптоматическая ЦМВ-инфекцияf
Нет — 109 (93) — 214 (91)
Даf — 8 (7) — 21 (9)
Синдром ЦМВ (только ТСО), n (%)d, f, g — 7 (88) — 10 (48)
Инвазивное заболевание тканей, n (%)f, d, g — 1 (13) — 12 (57)
ЦМВ=цитомегаловирус, ДНК=дезоксирибонуклеиновая кислота, ТГСК=трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, IAT=лечение, назначенное исследователем против ЦМВ, max = максимум, min = минимум, N=количество пациентов, ТСО=трансплантация солидных органов
a Исходный уровень определялся как последнее значение на дату или до даты первой дозы назначенного в исследовании лечения или дату рандомизации для пациентов, которые не получали назначенное в исследовании лечение.
b Проценты основаны на количестве пациентов в рандомизированном наборе в каждом столбце. Самый последний анти-ЦМВ агент, используемый для подтверждения критериев рефрактерности.
c Самая последняя трансплантация.
d Проценты основаны на количестве пациентов в категории.
e Вирусная нагрузка была определена для анализа по исходным результатам кПЦР ДНК ЦМВ в плазме центральной специализированной лаборатории как высокая (≥91 000 МЕ/мл), промежуточная (≥ 9 100 и < 91 000 МЕ/мл) и низкая (< 9 100 МЕ/мл)
f Подтверждено Комитетом по рассмотрению конечных точек (EAC).
g Пациенты могут иметь ЦМВ-синдром и тканевое инвазивное заболевание.
Первичной конечной точкой эффективности был подтвержденный клиренс виремии ЦМВ (концентрация ДНК ЦМВ в плазме ниже нижнего предела количественного определения (< LLOQ, т. е. < 137 МЕ/мл) на неделе 8 независимо от того, было ли прекращено назначенное в исследовании лечение до окончания предусмотренных 8 недель терапии. Ключевой вторичной конечной точкой был клиренс виремии ЦМВ и контроль симптомов ЦМВ-инфекции на 8-й неделе с сохранением этого эффекта лечения в течение 16-й недели исследования. Контроль симптомов ЦМВ-инфекции определялся как исчезновение или улучшение ткане-инвазивного заболевания или ЦМВ-синдрома у пациентов с симптомами на исходном уровне или отсутствие новых симптомов у пациентов, которые не имели симптомов на исходном уровне.
Для первичной конечной точки Ливтенсити превосходил IAT (56% против 24% соответственно, p < 0,001). Что касается ключевой вторичной конечной точки, 19% против 10% достигли как элиминации виремии ЦМВ, так и контроля симптомов ЦМВ-инфекции в группе Ливтенсити и IAT, соответственно (p = 0,013) (см. Таблицу 4)
Таблица 4. Анализ первичной конечной точки и основной конечной точки эффективности (рандомизированный набор) в испытании 303
IAT (N=117) n (%) — ЛИВТЕНСИТИ 400 мг два раза в день (N=235) n (%)
Первичная конечная точка: ответ на элиминацию ЦМВ-виремии на 8-й неделе
Общее
Имевшие ответ — 28 (24) — 131 (56)
Скорректированная разница в доле имевших ответ (95% ДИ)a — 32.8 (22.8, 42.7)
p-значение: скорректированоa — < 0.001
Ключевая вторичная конечная точка: достижение клиренса виремии ЦМВ и контроля симптомов ЦМВ-инфекцииb на 8-й неделе с поддерживающим лечением до 16-й неделиb
Общее
Имевшие ответ — 12 (10) — 44 (19)
Скорректированная разница в доле имевших ответ (95% ДИ)a — 9.45 (2.0, 16.9)
p-значение: скорректированоa — 0.013
ДИ = доверительный интервал; ЦМВ=цитомегаловирус; ТГСК = трансплантация гемопоэтических стволовых клеток; IAT = лечение против ЦМВ, назначенное исследователем; N=количество пациентов; ТСО = трансплантация солидных органов.
a Для скорректированной разницы в доле (марибавир-IAT), соответствующего 95% ДИ и значения p после корректировки на тип трансплантата и исходную концентрацию ДНК ЦМВ в плазме использовали средневзвешенный метод Кохрана-Мантеля-Хензеля.
b Контроль симптомов ЦМВ-инфекции определялся как разрешение или улучшение тканеинвазивного заболевания или ЦМВ-синдрома у пациентов с симптомами на исходном уровне или отсутствие новых симптомов у пациентов, у которых не было симптомов на исходном уровне.
Лечебный эффект Ливтенсити был одинаковым в зависимости от типа трансплантата, возрастной группы и наличия ЦМВ-синдрома/заболевания на исходном уровне. Однако Ливтенсити был менее эффективен в отношении лиц с повышенным уровнем ДНК ЦМВ (≥50 000 МЕ/мл) и лиц с отсутствием генотипической резистентности (см. таблицу 5).
Таблица 5: Пациенты, имевшие ответ, по подгруппам в испытании 303
IAT (N=117) — ЛИВТЕНСИТИ 400 мг два раза в день (N=235)
n/N — % — n/N — %
Тип трансплантации
ТСО — 18/69 — 26 — 79/142 — 56
ТГСК — 10/48 — 21 — 52/93 — 56
Исходная вирусная нагрузка ДНК ЦМВ
Низкая — 21/85 — 25 — 95/153 — 62
Средняя/Высокая — 7/32 — 22 — 36/82 — 44
Генотипическая устойчивость к другим анти-ЦМВ агентам
да — 14/69 — 20 — 76/121 — 63
нет — 11/34 — 32 — 42/96 — 44
ЦМВ-синдром/заболевание на исходном уровне
да — 1/8 — 13 — 10/21 — 48
нет — 27/109 — 25 — 121/214 — 57
Возрастная группа
18 - 44 — 8/32 — 25 — 28/55 — 51
45 - 64 — 19/69 — 28 — 71/126 — 56
≥ 65 лет — 1/16 — 6 — 32/54 — 59
ЦМВ = цитомегаловирус, ДНК = дезоксирибонуклеиновая кислота, ТГСК = трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, ТСО = трансплантация солидных органов
Рецидив
Вторичная конечная точка рецидива ЦМВ-виремии была зарегистрирована у 57% пациентов, получавших марибавир, и у 34% пациентов, получавших IAT. Из них 18% в группе марибавира имели рецидив виремии ЦМВ во время лечения по сравнению с 12% в группе IAT. Рецидив виремии ЦМВ во время наблюдения наблюдался у 39% пациентов в группе марибавира и у 22% пациентов в группе IAT.
Общая смертность. Смертность от всех причин оценивалась в течение всего периода исследования. Одинаковый процент пациентов в каждой группе лечения умер во время исследования (Ливтенсити 11% [27/235]; IAT 11% [13/117]).
Дети
Европейское агентство по лекарственным средствам отложило обязательство по представлению результатов исследований препарата Ливтенсити в одной или нескольких подгруппах детей для лечения цитомегаловирусной инфекции (см. раздел 4.2).